Grand Duchess Anastasia Nikolaevna dari Rusia (bahasa Rusia: Великая Княжна Анастасия Николаевна Романова, bahasa Inggris: Velikaya Knyazhna Anastasia Nikolaevna Romanova, 18 Juni [O.S. 5 Juni] 1901 - 17 Juli 1918) adalah putri bungsu Tsar Nikolay II dari Rusia dan istrinya Alexandra Fyodorovna. Anastasia dibunuh bersama keluarganya pada 17 Juli 1918 oleh polisi rahasia Bolshevik. Dia adalah saudara perempuan dari Grand Duchess Olga, Grand Duchess Tatiana, Grand Duchess Maria, dan Alexei Nikolaevich, Tsarevich dari Rusia.

Selama tahun-tahun pemerintahan Komunis, tidak ada yang tahu di mana dia dimakamkan. Hal ini menyebabkan banyak cerita bahwa dia bisa saja melarikan diri dan masih hidup. Jasad Tsar, Tsarina, dan tiga putrinya ditemukan di sebuah kuburan dekat Yekaterinburg pada tahun 1991; namun, jasad Alexei Nikolaevich dan salah satu saudarinya (entah Anastasia atau Maria) tidak ada di sana.

Pada bulan Januari 2008, para ilmuwan Rusia mengatakan bahwa sisa-sisa jasad seorang anak laki-laki dan perempuan yang ditemukan di dekat Yekaterinburg pada bulan Agustus 2007 mungkin adalah jasad yang hilang. Pada 30 April 2008, para ilmuwan Rusia menggunakan tes DNA untuk membuktikan bahwa mereka adalah Tsarevich Alexei dan saudara perempuannya. Michael Coble dari Laboratorium Identifikasi DNA Angkatan Bersenjata AS. Ini membuktikan bahwa keempat Grand Duchesses dibunuh.

Beberapa wanita telah mengklaim sebagai Anastasia. Yang paling terkenal adalah Anna Anderson. Namun, pengujian DNA pada tahun 1994 pada potongan jaringan dan rambut Anderson menunjukkan bahwa dia tidak terkait dengan keluarga Kekaisaran.