Garis Wallace (atau 'Garis Wallace') adalah batas yang memisahkan ekozon Asia dan ekozon Australasia. Zona transisi kadang-kadang disebut Wallacea.
Tumbuhan dan hewan yang terkait dengan spesies Asia ditemukan di barat laut. Spesies Australasia ditemukan terutama di tenggara, dengan beberapa spesies Asia. Garis ini dinamai Alfred Russel Wallace, yang melihat garis pemisah yang jelas ini selama perjalanannya melalui Hindia Timur pada abad ke-19.
Jalur ini melintasi Indonesia, antara Kalimantan dan Sulawesi (Celebes); dan melalui Selat Lombok antara Bali (di barat) dan Lombok (di timur).
Jarak antara Bali dan Lombok hanya sekitar 35 kilometer. Anehnya, distribusi banyak spesies burung mengamati garis tersebut, karena banyak burung tidak melintasi bahkan bentangan terkecil dari perairan laut terbuka. Beberapa kelelawar memiliki distribusi yang melintasi Garis Wallace, tetapi mamalia lainnya umumnya terbatas pada satu sisi atau sisi lainnya; pengecualian adalah Kera Pemakan Kepiting. Kelompok tumbuhan dan hewan lainnya menunjukkan pola yang berbeda, tetapi pola keseluruhannya mencolok dan cukup konsisten.
Istilah 'Garis Wallace' pertama kali digunakan oleh Huxley pada tahun 1868.

