U.S. Route 81 atau U.S. Highway 81 (US 81) adalah jalan raya utama utara-selatan AS. Jalan raya ini membentang sejauh 1.220 mil (1.960 km) di Amerika Serikat bagian tengah. Ini adalah salah satu Jalan Raya Bernomor Amerika Serikat asli yang dibuat pada tahun 1926 oleh American Association of State Highway Officials.
Rute US 81 mengikuti rute Meridian Highway lama yang sudah ada sejak tahun 1911. Jalan raya ini secara bergantian (dan tidak resmi) dikenal sebagai bagian dari Pan-American Highway. Pada bagian di negara bagian Oklahoma, jalan raya ini mengikuti Chisholm Trail lama untuk perjalanan ternak dari Texas ke rel kereta api di Kansas pada tahun 1860-an dan 1870-an.
Pada tahun 2004, titik akhir utara jalan raya ini berada tepat di utara Pembina, North Dakota, di perbatasan Kanada.
Titik akhir selatannya berada di Fort Worth, Texas, di persimpangan dengan I-35W dan US 287. Antara tahun 1926 dan 1991, titik akhir selatan US 81 berada di perbatasan Meksiko di Laredo, Texas. Pada tahun 1991, titik akhir dipindahkan ke San Antonio.