Margot Betti Frank (16 Februari 1926 - awal Maret 1945) adalah kakak perempuan Anne Frank. Dia lahir di Frankfurt dan meninggal karena tifus di kamp konsentrasi Bergen-Belsen. Menurut buku harian adiknya Anne yang terkenal, Margot juga membuat buku harian, tetapi tidak ada jejak buku harian Margot yang pernah ditemukan. Margot yang pendiam dan sopan sangat berbeda dengan Anne, adiknya yang energik dan ramah. Dia adalah putri sulung Otto Frank (1889 - 1980), seorang pengusaha Jerman, dan Edith Frank-Holländer (1900 - 45). Dia dinamai sesuai nama saudara perempuan ibunya. Menurut buku harian Anne, Margot ingin menjadi bidan di Palestina.
Pada tanggal 13 Maret 1933, pemilihan umum diadakan di Frankfurt, dan Partai Nazi Adolf Hitler menang. Tindakan Antisemitisme segera dimulai. Keluarga Frank takut akan apa yang mungkin terjadi pada mereka jika mereka tetap tinggal di Jerman. Oleh karena itu, akhir tahun itu, Edith, Anne, dan Margot pergi ke Aachen. Mereka tinggal di sana bersama ibu Edith, Rosa Holländer. Otto tetap tinggal di Frankfurt, tetapi setelah mendapatkan tawaran untuk memulai sebuah perusahaan di Amsterdam, ia pindah ke sana untuk memulai bisnis dan mencari tempat tinggal bersama keluarganya. Keluarga Frank termasuk dalam 300.000 orang Yahudi yang melarikan diri dari Jerman antara tahun 1933 dan 1939.
Anne sering merasa cemburu pada adiknya, yang menurutnya cantik, pintar, dan kesayangan semua orang, dan Margot tidak sering disebut-sebut dalam buku hariannya. Namun, ketika kakak beradik itu bersembunyi, mereka menjadi lebih dekat satu sama lain. Pada tanggal 12 Januari 1944, Anne menulis, "Margot jauh lebih baik .... Dia hampir tidak begitu kikir akhir-akhir ini dan menjadi teman sejati. Dia tidak lagi menganggap saya sebagai bayi kecil yang tidak masuk hitungan."